Kidney Int ：肾小管生物钟调节功能障碍导致糖尿病患者肾糖异生增强和加重肝功能

背景及目标：在肝炎患儿里面，肾脏脏通过提高原粪里面的重吸收和上调近端毛细血管里面的代谢来促进肝炎心力衰竭的愈演愈烈。然而，食欲水平的慢性升高或许反过来随之而来肝炎白血病(DN)，这是肝炎最严重的并发症之一，其基本特征是肾脏小球、肾脏毛细血管和肾脏脏血管受损。虽然新陈代谢应激是肝炎白血病愈演愈烈和发展的主要主因，但在大多数肝炎患儿里面，心力衰竭本身并不想随之而来肾脏功能不全。这指出，合并症或环境、遗传基因或表观遗传基因的巨大变化或许是启旋和/或加速成果DN所必需的。节律是一种普遍存在的分子计时选择性，它将细胞、许多组织和系统的生命体功能与24足足的环境长周期该系统。局部节律驱旋细胞类改型和许多组织特有的节律，它们的痉挛与一系列疟疾的发病和/或成果有关。然而，肝炎患儿肾脏脏里面内在节律的病理生理作用仍不清楚。

方法律条文：为了克服这个问题，我们用链脲敦有效成分诱导了足细胞(cKOp血清)或肾脏毛细血管(cKOt血清)里面缺乏昼夜节律激活适度因子BMAL1的血清患I改型肝炎。

血清模改型制备：8周龄Bmal1lox/lox/Nphs2-RTTA/LC1血清(cKOp血清)或8周龄Bmal1lox/lox/Pax8-RTTA/LC1血清(cKOt血清)经DOX(饮水里面2 mg/ml)处理方式2亦同，Bmal1(ARNTL)蛋白质失活。他们的样本(Bmal1lox/lox血清)接受相同的DOX治疗。在DOX治疗结束一亦同，通过腹膜药剂链脲敦有效成分(STZ，50 mg/kg肥胖，每日5天)诱导I改型肝炎。溶媒处理方式的血清接受PBS的溶媒药剂。所有测试均在就此一次药剂STZ或溶媒8亦同透过。在所有测试里面，从ZT9处死的血清头上采集许多组织和血液循环(ZT-Zeitgeber时间单位；ZT0是开灯时间，ZT12是关灯时间)。

新陈代谢笼：血清被饲养在个体新陈代谢笼子里面(Tecniplast，博洛尼亚)。在4天的适应期后透过24足足的体液抽取。

体液和体液生化定量：用Vaudois里面心医院临床测试室(LCC)定量粪和体液Na+、K+、Ca2+、Mg2+、磷酸盐、肌酐、、排泄和粪素分子量及渗透压。用强碱仪(Metrohm)定量体液pH绝对值。常用EPOC血液循环系统性仪(西门子医疗)校准旋-血管混合血的血液循环pH绝对值和血气。粪铵定量采用Berthelot法律条文。粪可滴定酸定量采用Chan25方法律条文。采用放射免疫法律条文(DPC)定量体液醛固酮水平。用Mercodia公司的试剂盒定量体液食欲。

耐量试验车(GTT)：禁食15足足后，给空白样本和cKOt血清腹膜药剂(1g/kg肥胖)。分别于药剂前(t=0)、药剂后15、30、60、90、120、180min，用食欲读数仪定量食欲。

食欲耐量试验车(ITT)：禁食4h后，给样本和cKOt血清腹膜药剂0.5U/kg肥胖的整合人食欲(人整合食欲，Sigma)。分别于食欲药剂前(t=0)、食欲药剂后15、30、45、60、90、120、150、180min定量食欲。如果食欲降至2 mm一般而言，则通过腹膜药剂30毫克救下血清，并将其意味著在系统性之外。

RNA高通量技术：RNA-SEQ按照Ansermet等人在6.Mus Musculus里面的说明了透过。常用GRCm38.92蛋白质注释。常用TMM消去对蛋白质计算透过定标，并常用LIMMA R包27里面的“CPM”formula_将其对数转换为每百万计算(CPM)。计算了KO和Ctrl旋物在需注意(PBS)和处理方式(STZ)有条件下的差异表达以及两者之间的相互作用。对于这三种比较里面的每一种，选择FDR

结果：在患有肝炎的cKOp和cKOt血清里面，节律功能障碍与肝炎白血病的愈演愈烈没有相关性。然而，与链脲敦有效成分治疗的样本相比，患有肝炎的cKOt血清展现出出加心力衰竭更为严重，粪里面排泄提高，多粪提高，肾脏脏肥大更明显。mRNA和蛋白质表达系统性推断，与肝炎样本血清相比，cKOt肝炎血清肾脏脏里面的代谢途径显著增强。CKOt肝炎血清的激活系统性和功能系统性确定了直接或间接受到影响代谢途径的多种选择性的巨大变化。

结论：我们证明了内在肾脏毛细血管节律功能障碍可通过增强肾脏近端毛细血管的代谢而更为严重肝炎心力衰竭，大幅度特别强调了节律适度在肝炎患儿里面的重要性。

原文出处：

Ansermet C， Centeno G， Bignon Y，et al.Dysfunction of the circadian clock in the kidney tubule leads to enhanced kidney gluconeogenesis and exacerbated hyperglycemia in diabetes.Kidney Int 2021 Nov 24